您现在的位置:首页> 外文学位 >文献详情

【6h】The effect of poly-L-lysine as a new cryoprotectant for ovine oocyte vitrification.

机译聚-L-赖氨酸作为绵羊卵母细胞玻璃化的新型防冻剂的作用。

【摘要】The objective of this study was to evaluate polyampholyte---Poly--L--lysine (PLL) as a new cryoprotectant for ovine oocyte vitrification, alternative to the traditionally used cryoprotectant dimethyl sulfoxide (DMSO). Recently, Matsumura et al. (2009) demonstrated that PLL effectively protects L929 mouse stem cells during cryopreservation. Oocytes were screened and collected from fresh ovine ovarian tissues, then randomly classed into two developmental stages, namely, germinal vesicle (GV) stage oocytes (immature) and metaphase 2 (M2) stage oocytes (mature). GV stage oocytes were vitrified immediately upon collection, while M2 stage oocytes were vitrified after 24 h in vitro culture for oocyte maturation. Each developmental group was subjected to two different vitrification solutions: (1) PLL based formula (5%, 10% PLL); (2) and DMSO based formula (10%, 20% DMSO, ethylene glycol, and holding medium), resulting in four groups: PLL: GV, PLL-M2, DMSO-GV, and DMSO-M2. In the first experiment, there are six replicated batches (block) for each group, and each batch was processed on the same day under the same condition. The normality of developing oocytes was examined under microscope. Normal oocytes showed the characteristics of homogeneous cytoplasm and intact zona pellucid, with abundant organelles uniformly dispersed within the plasma; while abnormal oocytes displayed a reduced amount of organelles and low density of granular cells. The data were analyzed with proc Glimmix procedure of SAS. The results showed that the oocyte survival rate (%) of PLL-M2 (80.13) was significantly (P<0.05) higher than PLL-GV (62.28); DMSO-M2 (63.99) was significantly (P<0.05) higher than DMSO-GV (40.50), whereas PLL-GV was significantly (P<0.05) higher than DMSO-GV, and PLL-M2 was in turn significantly (P<0.05) higher than DMSO-M2. There was no difference in survival rate after vitrification between group PLL-GV and DMSO-M2. For the trypan blue staining comparison, the number of PLL-M2 (25+/-2.89) was significantly (P<0.05) higher than PLL-GV (16+2.31). There was no significant difference between the density of the PLL based formula and DMSO based formula, at the same time, there were no different injuries found among layer 1, 2 and 3. However, more frequent injuries were found in vitrified groups than the control groups. In the process of vitrification, the removal of granular cell after 24 h in vitro maturation appeared to be important to the success of cryopreserved oocytes and more disrupted spindle with dispersion of chromosomes were found in GV stage vitrified groups than M2 stage ones. Furthermore, M2 stage oocytes have shown a high viability. In conclusion, PLL can be used as an alternative reagent for ovine oocytes vitrification, with a high efficiency in a lower concentration compared with the traditional DMSO protocol.

【摘要机译】这项研究的目的是评估聚两性电解质-聚-L-赖氨酸(PLL)作为绵羊卵母细胞玻璃化的一种新型防冻剂,替代传统的防冻剂二甲基亚砜(DMSO)。最近,松村等人。 (2009年)证明了PLL在冷冻保存过程中可以有效保护L929小鼠干细胞。从新鲜的绵羊卵巢组织中筛选并收集卵母细胞,然后随机分为两个发育阶段,即生泡(GV)阶段卵母细胞(未成熟​​)和中期2(M2)阶段卵母细胞(成熟)。 GV期卵母细胞在收集后立即玻璃化,而M2期卵母细胞在体外培养24小时后玻璃化以使卵母细胞成熟。每个发育组都要接受两种不同的玻璃化溶液:(1)基于PLL的公式(5%,10%PLL); (2)和基于DMSO的公式(10%,20%DMSO,乙二醇和保持介质),得出四组:PLL:GV,PLL-M2,DMSO-GV和DMSO-M2。在第一个实验中,每个组有六个重复的批次(块),并且每个批次在相同的条件下于同一天进行处理。在显微镜下检查发育中的卵母细胞的正常性。正常的卵母细胞具有均匀的细胞质和完整的透明带的特征,丰富的细胞器均匀地分散在血浆中。而异常卵母细胞则显示细胞器数量减少和颗粒细胞密度低。用SAS的proc Glimmix程序分析数据。结果表明,PLL-M2(80.13)的卵母细胞存活率(%)显着(P <0.05)比PLL-GV(62.28)高; DMSO-M2(63.99)显着(P <0.05)高于DMSO-GV(40.50),而PLL-GV显着(P <0.05)高于DMSO-GV,而PLL-M2则显着(P <0.05 0.05)高于DMSO-M2。 PLL-GV组和DMSO-M2组之间玻璃化后的存活率没有差异。对于锥虫蓝染色比较,PLL-M2(25 +/- 2.89)的数量显着(P <0.05)比PLL-GV(16 + 2.31)高。基于PLL的公式和基于DMSO的公式的密度之间没有显着差异,同时,在第1层,第2层和第3层之间没有发现不同的伤害。但是,玻璃化组中的伤害比对照组更常见组。在玻璃化过程中,体外成熟24小时后去除粒状细胞似乎对冷冻保存的卵母细胞的成功至关重要,在GV期玻璃化组中发现比M2期玻璃化组更多的破坏了纺锤体的染色体分散。此外,M2期卵母细胞显示出高生存力。总之,与传统的DMSO协议相比,PLL可以在较低的浓度下以较高的效率用作羊卵母细胞玻璃化的替代试剂。

【作者】Li, Nan.;

【作者单位】University of Nevada, Reno.;

【年(卷),期】2010(),

【年度】2010

【页码】42 p.

【总页数】42

【原文格式】PDF

【正文语种】eng

【中图分类】;

【关键词】

  • 相关文献
  • 联系方式:010-58892860转803 (工作时间) 18141920177 (微信同号)
  • 客服邮箱:kefu@capm.ac.cn
  • 京公网安备:11010802029741号 ICP备案号:京ICP备15016152号-1 六维联合信息科技(北京)有限公司©版权所有
  • 客服微信
  • 服务号
日本 v 影_亚洲 v 影_亚洲 a 电_欧美a电 国产a影_欧美a电_日本v影_亚洲v影 国产久久亚洲美女久久-国产亚洲日韩欧美看国产 午夜国产免费视频亚洲-在线欧美 精品 第1页 免费观看三级片_免费国产Av_免费国产黄片 亚洲 自拍 校园 欧美 日韩-久青草国产在线视频 亚洲 另类 小说 国产精品-香蕉国产精品偷在线观看 国产亚洲精品免费视频-国产亚洲日韩欧美看国产 国产亚洲精品香蕉视频播放-国产免费三级a在线观看 欧美图***另类偷偷自拍-亚洲 中文 字幕 国产 综合 国产亚洲日韩欧美看国产-99国产这里有精品视频 欧美 亚洲 日韩 国产 综合-国产亚洲日韩欧洲一区 五月丁香六月综合欧美-成长在线视频免费观看 免费视频一区二区三区-国语自产拍在线视频中文 欧美免费全部免费观看-亚洲 日韩 中文 综合av 国产国产成年在线视频区-色天天综合色天天久久婷婷 国产在线视频播放社区-五月丁香六月综合缴情基地 欧美亚洲综合另类无码-日本成本人片无码免费视频 五月丁香六月综合欧美-日本成本人片视频免费 亚洲 欧美 国产 综合五月天-亚洲欧美日本国产高清 精品AV综合导航-日本在线看片免费视频 日本欧美日韩中文亚洲-日本三级无码中文字幕 在线观看免费视频日本高清-成年大片免费视频播放 不卡本日Av网站_日本av网站-夜色撩人手机免费观看 国产Av在线看的_韩国日本免费不卡在线_免费aV 岛国a视频在线观看-三分钟免费观看视频 亚洲伊人***网站-国产免费三级a在线观看 大香中文字幕伊人久热大-伊人成综合网伊人222- 免费A级毛片_中国A级毛片_午夜国产免费视频亚洲-在线欧美 精品 第1页_a片在线观看 三级a片_成 三级 观看_人 三级 写真人体 三级真人牲交 free欧美高清猪马牛 我和狗做了4年都没事 午夜国产免费视频亚洲-在线欧美 精品 第1页 bt种子搜索 同房姿势108种 使劲里面痒想要 年轻的母亲线2免费 午夜国产免费视频亚洲-在线欧美 精品 第1页 爸爸快点我坚持不住了 午夜国产免费视频亚洲-在线欧美 精品 第1页 熟透的岳 熟妇的荡欲 午夜国产免费视频亚洲-在线欧美 精品 第1页 老熟妇乱子伦视频 亚洲五月六月丁香缴情 e欧美性情一线免费http 把你干到疼得下不了床 女人床上活好是啥样的 床戏 床 戏 三个人在一个床上做了 精品国产自在现线拍 免费A级毛片 特级做人爱c级 国内偷拍在线精品 国产精品香蕉视频在线 国产精品高清视频免费 朋友的姐姐线观高清2 欧美高清videosedexohd 迷人的保姆5线观高清 天天看高清影视在线观看 一本道理高清在线播放 日本一道本高清二区 天天看免费高清影视 一区二区三区高清视频 日本一大免费高清 欧美高清vitios 高清一区高清二区 天天看高清影视在线WWW 特级aav毛片欧美免费观看 午夜国产免费视频亚洲-在线欧美 精品 第1页 天天看大片特色视频 免费A级毛片 特级做人爱c级 午夜国产免费视频亚洲-在线欧美 精品 第1页 中国A级毛片 A级人体片 香港三级 公憩关系小说 欧美三级片 秋霞理论在一l级 超级乱婬长篇小说 天堂v无码亚洲一本道 中文字幕乱码 电影在线观看 中文字幕乱码免费 中文亚洲无线码 日本无码不卡中文免费 日本一本道免费天码av 中文欧美无线码 国产av在在免费线观看 精品国产自在现线拍 亚洲AV国产AV手机在线 久久爱www免费人成 女人哪种下面最受欢迎 小妖精一天不做就难受呀 非会员试看一分钟做受小视频 女人的性承受极限 偷窥女教师 妈妈的朋友4线观高清 4攻一受同时做宿舍 我的妻子的姐姐2 电影 家里没人半夜就和姐姐 younggir第一次young 坐车跟姐姐那个 爸不不要了太满了流来了 能看到让你流水的小说 蜜汁在马背上流下来 喷个不停gif出处 喷潮白浆直流视频在线 女人喷潮完整视频 吹潮流的水能喝吗 色综合亚洲色综合吹潮 美国式禁忌 老汉开花苞 免费人做人爱的视频 午夜国产免费视频亚洲-在线欧美 精品 第1页 a级做爰片 午夜国产免费视频亚洲-在线欧美 精品 第1页 做爱网站 白小姐四肖必选一肖 younggir第一次young 宝贝我有点大你忍一下 国语自产一区第二页 不卡无在线一区二区三区观 日本一大免费高清 日本一本免费一二三区 午夜国产免费视频亚洲-在线欧美 精品 第1页 在线不卡日本v二区 w006.top 五个大佬跪在我面前叫妈 gif动态图视频第五十八期 亚洲五月六月丁香缴情 五月爱婷婷六月丁香色 综合欧美五月丁香五月 色婷亚洲五月 五月爱婷婷六月丁香色 十大免费最污的直播 口述在车里下面被添 公车上强行被灌满浓精 坐车跟姐姐那个 呵呵我要别停我要死了 么公的好大好硬好深好爽想要 使劲里面痒想要 一晚上要了小姑娘三次 想要嘛人家想啊你快点嘛 求你们不要了np 老公说想放在里面睡觉 好妈妈快点想死我了 500短篇超污多肉推荐 很肉到处做1v1青梅竹马 可以免费观看的av毛片 午夜国产免费视频亚洲-在线欧美 精品 第1页 日本毛片18禁免费 日本高清免费毛片大全 午夜国产免费视频亚洲-在线欧美 精品 第1页 午夜国产免费视频亚洲-在线欧美 精品 第1页 18岁末年禁止观看试看一分钟 美国式禁忌5一11集 我的绝色总裁未婚妻 绝味儿媳妇txt 顶级少妇 荡公乱妇 玩弄放荡人妇系列 japanesewiif0孕妇 熟妇大尺度人体艺 玩两个少妇女邻居 美妇乱人伦小说 67194成l人在线观看线路 公憩关系小说 私欲小说 杂乱小说1第403部分 老师不行我做不下去了小说 图片区 偷拍区 小说区 销魂美女图库 做爱动态图 131美女做爰图片 gif动态图出处第900期 他抬高她的腰撞到最深处 甜宠肉H双处